多酚氧化酶試劑盒正確使用！

黃至暗褐色粉末或液體。編號：EC 1.10.3.1。催化鄰苯二酚氧化成鄰苯二醌，也能作用于單酚單加氧酶的底物   。淡黃至暗褐色粉末或液體。溶于水，不溶于乙醇。有吸濕性。相對分子質量約為125000，適pH為6.5，適溫度為2℃

PPO（EC1.10.3.1）主要存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化產生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質和組培等密切相關。

酶蛋白具有一般蛋白質的特性，在高溫或低溫條件下有易變性失活的特點。各類酶均有其活性的適溫度范圍，一般在30C～50℃范圍內酶活性*。酶若失活、變性，則就喪失了催化能力。酶的催化作用具有專一性，如多酚氧化酶，只能使茶多酚物質氧化，聚合成茶多酚的氧化產物茶黃素、茶紅素和茶褐素等；蛋白酶只能促使蛋白質分解為氨基酸。茶葉加工就是利用酶具有的這種特性，用技術手段鈍化或激發酶的活性，使其沿著茶類所需的要求發生酶促反應而獲得各類茶*的色香味。如綠茶加工過程中的殺青就是利用高溫鈍化酶的活性，在短時間內制止由酶引起的一系列化學變化，形成綠葉綠湯的品質特點。紅茶加工過程中的發酵就是激化酶的活性，促使茶多酚物質在多酚氧化酶的催化下發生氧化聚合反應，生成茶黃素、茶紅素等氧化產物，形成紅茶紅葉紅湯的品質特點。

實驗所需儀器：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提取：

1、收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復30次）；8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測。

2、稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測。

測定步驟：

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至525nm，蒸餾水調零。

2、樣本測定（在EP管中依次加入下列試劑）

37℃(哺乳動物)或25℃（其它物種）中準確水浴10min后，迅速放入冰浴中冷卻

充分混勻，5000g，常溫離心10min，收集上清，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，525nm處檢測測定管和對照管吸光度，計算ΔA=A測定-A對照。

本產品只供科研實驗用，不做其它用途！